
1 概述
上海析譜生產(chǎn)的紫外可見分光光度計(jì)TU-1901plus�(duì)于分析人員來說是zui有用的分析工具之一,幾乎每一�(gè)分析�(shí)�(yàn)室都離不開紫外可見分光光度計(jì),在食品檢測中同樣也是如�,它可以用來�(jìn)行食品的多種成分分析和檢測,�(yīng)用十分廣��
1�1 紫外可見分光光度�
紫外可見分光光度法是利用物質(zhì)分子�(duì)紫外可見光譜區(qū)的輻射的吸收來�(jìn)行分析的一種儀器分析方�。這種分子吸收光譜�(chǎn)生于�(jià)電子和分子軌道上的電子在電子能級(jí)間的躍遷,它廣泛用于無機(jī)和有�(jī)物質(zhì)的定性和定量分析�
朗伯一比耳定律(Lambert—Beer)是光吸收的基本定律,俗稱光吸收定律,是分光光度法定量分析的依據(jù)和基�(chǔ)。當(dāng)入射光波長一定時(shí),溶液的吸光度A是吸光物�(zhì)的濃度C及吸收介�(zhì)厚度l(吸收光程)的函�(shù)。其常用表達(dá)式為:A=E×l×C(式�,∈為系�(shù)�
1�2 紫外可見分光光度�(jì)
紫外可見分光光度�(jì)是基于紫外可見分光光度法的原理丁作的常規(guī)分析儀器。根�(jù)光路�(shè)�(jì)的不�,紫外可見分光光度計(jì)可以分為單光束分光光度計(jì)、雙光束分光光度�(jì)和雙波長分光光度�(jì)。各種型�(hào)的紫外可見分光光度計(jì),就其基本結(jié)�(gòu)來說,都是由5�(gè)基本部分組成,即光源、單色器、吸收池、檢測器及信�(hào)指示系統(tǒng)�
1�3 紫外可見分光光度�(jì)的特�(diǎn)
1�3�1 �(yīng)用廣�
在國際上�(fā)表的有關(guān)分析的論文中,光度法約占28%。由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外一可見區(qū)域都有吸�,兇此均可借此方法加以測定。在食品行業(yè),紫外可見分光光度計(jì)被廣泛應(yīng)用于食品檢測之中,得到越來越多的重視�
1�3�2 儀器價(jià)格相�(duì)低廉且分析成本低
紫外可見分光光度�(jì)�(jià)格相塒低�,分析成本低,在使用過程中儀器兒乎沒有什么耗損。食品企�(yè)大多屬于中小企業(yè),規(guī)模不大且利潤�,降低食品檢測費(fèi)用尤為重�,用紫外可見分光光度�(jì)作為主要檢測儀器可以大大減輕企�(yè)檢測成本�
1�3�3 操作簡便、快�
�(duì)一些保�(zhì)期較短的食品檢測要求操作簡便、快�,比如鮮牛奶的保�(zhì)期短(僅1天時(shí)間),對(duì)它的檢測必須要求簡便、快速,用紫外可見分光光度計(jì)就可以很好滿足此要求�
1�3�4 �(zhǔn)確度�
�(duì)于一般的分光光度法來�,濃度測量的相對(duì)誤差�1%~3%范圍內(nèi),如采用示差分光光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾�
2 紫外可見分光光度�(jì)在食品檢測中的應(yīng)�
�(dāng)分子中含�1�(gè)或更多的生色基團(tuán)(即具有不飽和鍵的原子基�(tuán)),輻射就會(huì)引起分子中電子能量的改變。常見的生色基團(tuán)有:
>C=0,一N=N一,一N=O,一C;N�>C=S
如果2�(gè)生色基團(tuán)之間只隔1�(gè)碳原子,則形成共軛基�(tuán),會(huì)使吸收帶移向較長的波長處(即紅移�,且吸收帶的�(qiáng)度顯著增�;當(dāng)分子中含有助色基�(tuán)�0�(shí)�,也�(huì)�(chǎn)生紅移效�(yīng)。常見的助色基團(tuán)有:
一OH,一NH2,一SH,一C1,一Br,一I
這些基團(tuán)在食品和食品添加劑中大量存在,所以紫外分光光度計(jì)在食品檢測中的應(yīng)用有著無可比擬的�(yōu)越�,其主要用途有以下幾點(diǎn)�
2�1 光度測量
在食品生�(chǎn)中為了保證有顏色的飲料(�Cola、果汁及茶飲料)�(chǎn)品的顏色一�,可以在可見光區(qū)用紫外可見分光光度計(jì)來測定其吸光度�,使色差符合�(chǎn)品要求。在�(fā)酵業(yè)中也可通過測定吸光度值來確定�(chǎn)品的�(fā)酵完成程�。對(duì)于一些成分比較單一的產(chǎn)品也可通過測定吸光度值來確定�(chǎn)品合格與�。比如,判定營養(yǎng)增強(qiáng)劑維生素Bl的質(zhì)量就可以�400nm下測定其吸光度�,當(dāng)其值不超過0�020�(shí),即可確定為合格��
2-2 成分的定性分�
物質(zhì)的吸收光譜本�(zhì)上就是物�(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應(yīng)�(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能�(jí)躍遷的結(jié)�。由于各種物�(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)�(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,因�,每種物�(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特性波長處的zui大吸收峰(峰值)和波形圖來判斷某種物�(zhì)是否存在。在食品生產(chǎn)中會(huì)使用一些食品添加劑,為了確定食品添加劑的質(zhì)�,可以用紫外可見分光光度�(jì)�(duì)其�(jìn)行光譜掃�。例�,對(duì)食品中涉及的一些復(fù)合甜味劑、復(fù)合防腐劑和復(fù)合鮮味劑等就可以用紫外可見分光光度計(jì)�(jìn)行一�(gè)全面掃描以排除違禁添加劑的使�。另�,此方法還可以在物質(zhì)�(jié)�(gòu)分析方面作為紅外光譜(IR�、核磁共振(NMR�、質(zhì)譜(Ms)等方法的輔助手��
2�3 成分的定量分�
塒于食品�(wèi)生安全檢測中一些含量需要嚴(yán)格控制的成分�(xiàng)目可以用紫外可見分光光度�(jì)來準(zhǔn)確檢�。食品中常用紫外可見分光光度�(jì)測定的項(xiàng)目見�1。表1食品中可用紫外可見分晃光度計(jì)檢測的項(xiàng)�
測定組分 方法 吸收波長(nm�
Pb 雙硫� 510
As 二乙氨基二硫代甲酸銀 510
Fe 鄰菲羅啉510
Cu 二乙氨基二硫代甲酸鈉 440
Cd 雙硫� 518
Hg 雙硫� 485
游離氯/總氯 N.N-二乙�-1,4-苯二� 510
亞硝酸鹽 N-(卜萘基)乙二胺 540
氟化� 氟試� 620
cyanide 異煙百曼I毗唑啉酮 638
甲醛 乙酰丙酮 414
二氧化硫 甲醛一鹽酸目I玫瑰苯胺 548
果膠 咔唑縮臺(tái)反應(yīng) 530
己糖 酚縮合反�(yīng) 490
戊糖 酚縮合反�(yīng) 480
甲基戊糖 酚縮�(tái)反應(yīng) 480
果糖 蒽酮� 620
葡萄� 鄰聯(lián)甲苯� 625
脂肪 銅試贏整� 700
2�4 DNA/蛋白分�
DNM蛋白�(zhì)為生物大分子,所�(chǎn)生的紫外光吸收往往是其分子�(nèi)的小基團(tuán)所引起的,例如嘌呤�、嘧啶堿、酪氨酸、苯丙氨�、色氨酸和肽鍵等。嘌呤堿、嘧啶堿以及由它們參與組成的核苷、核苷酸及核酸對(duì)紫外光有�(qiáng)烈的吸收,在吸收波長260nm處有zui大吸收�。在蛋白�(zhì)分子�,酪氨酸(T、苯丙氨酸(Phe�、色氨酸(Trp)殘基的苯環(huán)含有共軛雙鍵�
該共軛雙鍵對(duì)紫外光有吸收(其中zui大吸收Tyr在吸收波�274fiB;Phe在吸收波�257nm;Trp在吸收波�280Flm�,從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)�(duì)紫外光有吸收。肽鍵對(duì)紫外光的zui大吸收在吸收波長238nm。利用這�(gè)特性可以準(zhǔn)�、可靠地測定乳制品中蛋白�(zhì)含量�
3 �(jié)�
總之,紫外可見分光光度計(jì)幾乎可以滿足廣大中小食品企業(yè)食品檢測分析的需要。隨著科�(xué)技�(shù)的發(fā)�,紫外可見分光光度計(jì)還可和其他分析儀器聯(lián)�(jī)使其�(yīng)用范圍更加廣泛,能在更多的領(lǐng)域發(fā)揮作��